尊龙凯时推出的检测试剂盒基于探针法荧光定量PCR原理，具有以下特点：

产品特性

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。

2. 优化引物：经过优化的引物及其他组分使得试剂盒的灵敏度更高。

3. 附带阳性对照：方便用户区分假阴性样品。

4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，有效避免与其他生物样本DNA的交叉反应。

5. 多功能检测：既可用作定性检测，也可进行定量检测，线性范围至少达到五个数量级。

6. 量大实惠：本产品可支撑50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。

7. 科研专用：本试剂盒仅限于科研使用。

使用方法

一、DNA提取（样本制备区）

用户可根据自身需求选择适合的方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒相容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

由于阳性对照浓度较高，稀释操作需在独立区域进行，以避免污染本试剂盒或样品。

1. 标记六个离心管，分别标记为7、6、5、4、3、2。

2. 使用移液枪加入45μL DEPC-H2O。

3. 在7号管中加入5μL阳性对照（1×10E8拷贝/μL），震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，备用。

4. 逐步稀释至所需浓度，直至获得六个不同稀释度的标准曲线样品。

三、试剂配制（试剂准备区）

准备数量为N+2个qPCR管，其中包括N个待检样品、1个阴性对照和6个阳性对照，并向各管中添加相应试剂，具体成分可参考详细说明书，随时向尊龙凯时索取。

四、添加模板（模板添加区）

向每个qPCR管中添加2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板，并结束后轻轻离心30秒，立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放置于扩增仪器的样品槽中，设置扩增程序，详情请参考说明书。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，进而推算样品DNA浓度。

2. 如果未制作标准曲线，依据如下标准评定结果：阳性对照Ct值应<30且展示典型的S型曲线；阴性对照Ct值应为38或无Ct值；样本检测结果为阳性或阴性时需根据Ct值进行判定。具体指标请参照说明书。

运输及保存

本产品需低温运输，保存于-20℃条件下，保存期限为一年。阳性对照需单独放置，避免污染其他试剂。